Техническое описание
Трансфер факторы – это молекулы, обеспечивающие обмен антигенной иммунологической информацией между клетками организма и от донора к реципиенту. Они поддерживают иммунную функцию посредством клеточного звена иммунитета (СMI). Трансфер факторы, несущие специфическую антигенную информацию, с которой реагируют иммунные клетки, производятся мононуклеарными клетками и служат для поддержки и улучшения опосредованного иммунного пути. Трансфер факторы млекопитающих и человека – это небольшие молекулы размерами между 3500 и 10000 дальтон. (1; 2) Трансфер факторы являются полипептидами, состоящими от 40 до 44 аминокислот (3), имеют консервативную и вариабельную области. С молекулярно-биологической точки зрения, эти два свойства являются аналогами антител; однако функции трансфер фактора в клеточно-опосредованном иммунитете (CMI) и неспецифической иммунологической активности практически полностью отличаются от функций антител. Молекулы, имеющие молекулярный вес менее 3500 дальтон, могут модулировать иммунный ответ, но они не передают реакции гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ). (1)
Трансфер факторы компании 4Life получены путём ультрафильтрации из молозива и из куриных желтков. (4; 5) Полученные таким образом молекулы бывают двух классов: Трансфер факторы, присутствующие в ультра-фильтрате с массой ≤10.000 дальтон и молекул нанофракции, присутствующих в нано-фильтрате с массой ≤3,500 дальтон.
Трансфер факторы были впервые открыты в 1949 году Г. Шервудом Лоуренсом (H. Sherwood Lawrence) , когда он показал, что CMI может быть передан от одного индивидуума другому при помощи низкомолекулярного экстракта белых клеток крови. Трансфер факторы обладают способностью переносить гиперчувствительность замедленного типа (DTH) конкретной формы от индивидуума с положительной реакцией кожного теста к индивидууму с отрицательной реакцией, который после переноса будет иметь положительный тест на кожу для этого антигена. В последующем исследовании, проведенном в 1955 году, он продемонстрировал, что DTH может передаваться последовательно, сначала от индивидуума с положительным кожным тестом к индивидууму с отрицательной реакцией, который после этого начал демонстрировать положительную реакцию, а затем через 6 месяцев от этого второго человека к другому индивидууму с отрицательной реакцией, который после этого также начал демонстрировать положительную реакцию. В то время в фокусе иммунных исследований были антитела, и о важности DTH, а также о роли Т-клеток в выработке иммунного ответа было мало что известно. Трансфер факторы способствуют улучшению здоровья через клеточно-опосредованный иммунитет. Эти соединения являются компонентами молозива, первой еды младенца. Они позволяют преодолеть разрыв между поколениями, передавая клеточно-опосредованный иммунитет от матери к ребенку.
Биологическое и физиологическое действие
Трансфер факторы препараты содержат более 200 различных элементов полипептидных молекул с молекулярной массой <10000 дальтон; каждый элемент потенциально имеет большое количество вариаций эпитопов – [Эпитоп, или антигенная детерминанта — часть макромолекулы антигена, которая распознаётся иммунной системой]. Эти антиген-специфические факторы синтезируются в моноцитах и находятся в цитоплазме или на мембране клетки. Значительное количество доказательств указывает, что основной биологической функцией трансфер факторов является «обучение» и «тренировка» незрелых иммунных клеток. Эти сенсибилизированные Т-лимфоциты инициируют события клеточного иммунитета, таким образом, повышая иммунитет не только на небольшой поверхности внедрения антигена, но и по всему организму. (8) Влияние трансфер факторов на антиген-опосредованный иммунитет, через B-лимфоциты, еще полностью не изучено; однако клинические испытания сообщают об увеличении, в частности антител, таких как IgA и IgG, при введении трансфер фактора.
Клинические исследования показали, что уникальная способность трансфер факторов проявлять реакции ГЗТ и способствовать клеточно-опосредованному иммунитету, может передаваться от сенсибилизированных доноров к неиммунным реципиентам. (1; 9) Этот антиген-специфический эффект хорошо описан и, вероятно, реализуется путем активации CD3-антигенного участка Т-клеток, повышением активации макрофагов и производства интерлейкинов, что также может усилить функцию NK-клеток (естественных киллеров). (1; 10)
Хотя точный механизм действия неизвестен, исследования показали, что трансфер факторы будут связываться с антигенами. Однако специфичность антигена, которая “передается” реципиентам, опосредуется Т-лимфоцитами. Опираясь на модель нынешней структуры можно предположить, что трансфер факторы имеют большое количество, до 818, уникальных аминокислотных последовательностей, которые и дают возможность трансфер факторам быть антиген-специфичными. (1) Трансфер факторы также имеют высоко консервативные области, которые позволяют им проникать через видовой барьер без потери активности. На самом деле, исследования показали, что трансфер факторы коров структурно аналогичны полученным от человека и эквивалентны в передаче физиологической активности. (11) Это дополнительно подтверждено в ряде исследований, в которых использовались Трансфер факторы, извлеченные из коровьих лимфатических узлов и молозива, чтобы передать другим животным и человеку клеточный иммунитет к специфическим антигенам. (12; 13)
Хотя в большинстве клинических исследований с трансфер факторами использовали парентеральное введение, пероральный прием также продемонстрировал успешную передачу ГЗТ (DTH) и клеточного иммунитета для реципиентов. (14) У человека и животных была использована одинаковая доза препаратов для исследования реагирования при различных путях введения. Результаты этих экспериментов опровергают любые аргументы, которые утверждают, что кислотная или ферментативная среда желудочно-кишечного тракта понижает эффект при пероральном введении трансфер факторов.
КЛИНИЧЕСКИЕ И ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
Активность клеток - натуральных киллеров
Был взят пул мононуклеарных клеток из периферической крови нескольких здоровых доноров. По шестьдесят тысяч клеток были добавлены в каждую лунку в 96-луночного микротитровального планшета. В лунки были добавлены различные иммуномодулирующие ингредиенты, включая 4Life Трансфер фактор три-фактор формула и оставлены на инкубацию в течение 48 часов. В конце инкубационного периода в каждую лунку были добавлены 30 тыс. клеток K562. Были использованы методики «МТТ-теста» для определения цитотоксического индекса. Применение различных 4life Трансфер факторов привело к 80-98% цитотоксическому показателю. Для сравнения, мононуклеарные клетки, инкубированные с ИЛ-2 на тот же 48-часовый период произвели 88% цитотоксический индекс.
Исследование активности CD-4 клеток
Были проведены многочисленные исследования с использованием одобренного FDA пробирного комплекта для диагностики CD-4 Т-хелперных клеток и/или комплекта для диагностики Т-клеток памяти (CD-8) той же компании. Как и при методе изучения NK-клеток, описанном выше, исследования были проведены на 96-луночном титровальном планшете методом измерения выработки АТФ на основе реакции люминесценции люциферазы.
Исследовались клетки CD-4, стимулированные ФГА, выделенные из цельной крови с использованием системы Dynabeads™. 18-ти часовая инкубация этих изолированных, стимулированных CD-4 клеток совместно с продукцией 4Life Трансфер фактор, привела к модуляции их иммунной активности, выражающейся снижением производства АТФ, без отрицательного воздействия на жизнеспособность клеток. Было предположено, что сокращение выработки АТФ является результатом снижения активности иммунных клеток, существенно уменьшающим их перевозбуждение, вызванное добавлением ФГА в лунки.
Содержание секреторного IgA в слюне – предварительные исследования
Двадцать четыре субъекта [человека], ранее не получавших трансфер фактор в виде добавок, были зачислены в маломасштабные предварительные испытания. Двадцать один субъект был включен в окончательный анализ. Образцы слюны собирались у каждого еженедельно примерно в то же время суток и день недели. Слюна была собрана в течение 5-минутного периода с помощью пассивного вытекания слюны, в течение которого субъект жевал кусок Parafilm™. Образцы слюны помещали на лед, а затем замораживали при -70ºC до оценки анализа. Для анализа IgA в слюне использовали Коммерческий комплект Salimetrics ™. Участвующие в исследовании Субъекты принимали 4Life Трансфер Фактор Три-Фактор Формула по 2 капсулы в день в течение двух недель, а затем - 4Life Трансфер Фактор RioVida Tri-фактор Формула по 60 мл в день в течение 2 недель. В конце 4-недельного периода приема добавок группа показала среднее увеличение производства секреторного IgA в слюне (SIgA) на 73% от исходного значения. Кроме того, по окончании теста, ни один из 21 обследуемых субъектов не показал уровень секреторного IgA меньше, чем было его исходное значение.
Оздоровительные исследования
Исследования, проведенные с 30 студентами колледжа, показали, что 15-ти или 30-ти дневное (2 х 15 с перерывом в две недели) применение Трансфер факторов в дозе, указанной на этикетке, помогло им сохранить здоровье. В обеих группах применение трансфер факторов улучшило количество CD8+ T-клеток и НК-клеток до уровней здорового человека. В частности, те, кто принимал продукцию 4Life в течение 2х15 дней показали, более длительное поддержание здоровья и улучшение клеточных маркеров, чем те, кто применял её в течение 15 дней. Конкретно, поддержание хорошего состояния здоровья и уровня клеточных маркеров сохранялось в течение более 3-х месяцев после прекращения приема продукции курсом 2х15 дней, по сравнению с 1 месяцем у тех, кто принимал продукт 1х15 дней. (15)
Безопасность
В исследованиях по оценке острой токсичности крысы в течение 14 дней получали 4Life Трансфер фактор через желудочный зонд. Пять белых лабораторных крыс-самцов получали через желудочный зонд 4Life Трансфер фактор в дозе 2000 мг/кг. Смертности, связанной с лечением, не было, как и не было никаких клинических признаков токсичности. Не наблюдалось никаких существенных различий в массе тела. При вскрытии любого из животных не было найдено серьезных поражений. Таким образом, доза острой токсичности определяется на уровне более 2000 мг/кг (эквивалентная доза для человека – примерно 320 мг/кг). (16)
Другое подобное однократное пероральное исследование токсичности было проведено на мышах. Шесть лабораторных белых мышей-самок получали по 2000 мг/кг 4Life Трансфер фактор через пероральный зонд с последующим контролем в течение 14 дней. Никакой наблюдаемой токсичности не отмечалось, оценивая по смертности, увеличению массы тела, гистопатологии мозга, печени, почек и легких, клиническим признакам агрессии, летаргии, затруднениям дыхания, диарее, подвижности и дрожи. Таким образом, уровень, при котором отсутствует наблюдаемый отрицательный эффект, определяется более 2006 кг/кг для мышей, что эквивалентно приблизительно 9,7 г/день для человека. (17)Недавние исследования токсичности, выполненные независимой лабораторией токсикологии, были проведены для оценки потенциала мутагенности и генотоксичности 4Life Трансфер фактора. Мутагенность оценивали с помощью анализа бактериальной обратной мутации. Результаты показали, что 4Life Трансфер Фактор не обладает мутагенной активностью в любой из тестируемых концентраций. Генотоксичность оценивали методом учета хромосомных аберраций у млекопитающих. Результаты показали, что 4Life Трансфер Фактор, испытанный до максимальной рекомендуемой концентрации, не индуцирует структурные хромосомные аберрации у млекопитающих. Лаборатория сделала вывод о том, что 4Life Трансфер Фактор считается не кластогенным в этой системе.
В другом недавнем исследовании, проведенном той же лабораторией токсикологии, была оценена оральная токсичность 4Life Трансфер Фактор у крыс. В этом 14-дневном исследовании с повторяющейся дозой крысы-самцы и самки Wistar получали перорально через желудочный зонд 1050, 2100 или 4200 мг/кг массы тела/день 4Life Трансфер Фактор или плацебо. Результаты показали, что смертность не наступала при любой заданной дозе. Клинические наблюдения не выявили отрицательного влияния 4Life Трансфер Фактора на поведение и физическое состояние животных. Не наблюдалось аномального прироста массы тела при потреблении пищи. Офтальмологические и гематологические оценки не продемонстрировали неблагоприятного влияния 4Life Трансфер Фактора. Аналогичным образом, никаких изменений в клинической химии, общей патологии, весе органов и гистопатологии при любой данной дозе не наблюдалось. Был сделан вывод о том, что уровень наблюдаемого неблагоприятного эффекта превышает 4200 мг/кг у крыс. Это эквивалентно дозе 40 г/день для человека. (18)
Использование трансфер факторов противопоказано лицам, получающим иммуносупрессивную терапию, хотя фактические случаи не были задокументированы. Использование трансфер факторов во время беременности и кормления грудью не оценивалось.
Как поставляется:
4Life Трансфер Фактор входит в состав следующих продуктов:
4Life Transfer Factor® Tri-Factor® Formula
4Life® Transfer Factor Plus® Tri-Factor® Formula
4Life Transfer Factor® RioVida® Tri-Factor® Formula
4Life Transfer Factor® Chewable Tri-Factor® Formula
4Life Transfer Factor® Classic
4Life Transfer Factor® Immune Spray
4Life Transfer Factor® Belle Vie®
4Life Transfer Factor® GluCoach®
4Life Transfer Factor® MalePro®
4Life Transfer Factor® ReCall®
4Life Transfer Factor Reflexion®
ИСПОЛЬЗОВАННАЯ ЛИТЕРАТУРА
1. Fundenberg, H. and G. Pizza. 1994, Progress in Drug Research, Vol. 42, pp. 309–400.
2. Lawrence, H.S. and W. Borkowsjy. (1-3), 1996, Biotherapy, Vol. 9, pp. 1-5.
3. Kirkpatrick, C.H. 4, 2000, Mol Med, Vol. 6, pp. 332-41.
4. Hennen, W. and D. Lisonbee. s.l. : U.P. Office, Editor., 2002, 4Life Research, LC:USA.
5. Wilson, G. and G. Paddock. s.l. : U.P. Office, Editor., 1989, Amtron, Inc: USA.
6. Lawrence, H.S. 4, 1949, Proc Soc Exp Biol Med, Vol. 71, pp. 516-22.
7. Lawrence, H.S. 2, 1955, J Clin Invest, Vol. 34, pp. 219-30.
8. Levin, A.S., L.E. Spitler, and H.H. Fundenberg. 1973, Annu Rev Med, Vol. 24, pp. 175-208.
9. Fudenberg, H. and H. Fudenberg. 1989, Ann Rev Pharmacol Toxicol, Vol. 29, pp. 475-516.
10. See, D., S. Mason, and R. Roshan. 2, 2002, Immunol Invest, Vol. 31, pp. 137-53.
11. Dwyer, John M. 1-3, 1996, Biotherapy, Vol. 9, pp. 7-11.
12. Wilson, G.B., R.T. Newell, and N.M. Burdash. 1, 1979, Cell Immunol, Vol. 47, pp. 1-18.
13. Radosevich, J.K., G.H. Scott, and G.B. Olson. 4, 1985, Am J Vet Res, Vol. 46, pp. 875-8.
14. Kirkpatrick, C.H. 1-3, 1996, Biotherapy, Vol. 9, pp. 13-6.
15. Klimov, V. and E. Oganova. in Euromedica Hannover 2004.Hannover, Germany: s.n., 2004. pp. 15-16.
16. Kabirov, K.K. 2009, unpublished: University of Illinois at Chicago.
17. Burbano, Z. and G. Sarmiento. 2013. Facultad de Ciencies Quirnicas, Universidad de Guayaquil, Ecuador.
18. Hirka, G et al. Toxi-Coop Zrt. Budapest, Hungary.